微生物實(shí)習(xí)心得體會(huì)(2)

病原微生物感染引起發(fā)病，院內(nèi)感染不斷增加。細(xì)菌由于人類不斷婪用抗菌藥物，耐藥性不斷增加，這些都嚴(yán)重危害人類健康。病原微生物在實(shí)驗(yàn)室潛在對(duì)實(shí)驗(yàn)室人員的威脅也日趨嚴(yán)峻。

生物安全的宣教必不可少，怎樣把只有基本微生物知識(shí)的學(xué)生，與臨床實(shí)驗(yàn)室大量面對(duì)病人標(biāo)本的采集、運(yùn)送、接種、培養(yǎng)、觀察、鑒定、藥敏、報(bào)告等各個(gè)環(huán)節(jié)的實(shí)踐結(jié)合起來(lái)，由基礎(chǔ)知識(shí)向?qū)�業(yè)技能有效轉(zhuǎn)化，把基礎(chǔ)理論知識(shí)在實(shí)習(xí)中有效發(fā)揮，與實(shí)踐相結(jié)合使之升華，是培養(yǎng)合格檢驗(yàn)人才的關(guān)鍵。

現(xiàn)就微生物室的實(shí)習(xí)帶教體會(huì)總結(jié)如下。

1、重視標(biāo)本送檢前的質(zhì)量控制。

微生物實(shí)驗(yàn)室每天都收到來(lái)自病房，門診病人送檢的大量標(biāo)本，有痰、中段尿、傷口分泌物、生殖道拭子、血培養(yǎng)、膿液、術(shù)中臨時(shí)所采集的標(biāo)本等等。標(biāo)本的采集、運(yùn)輸和處理是否得當(dāng)及時(shí)對(duì)試驗(yàn)結(jié)論有直接影響。

是分析前質(zhì)量控制的重要環(huán)節(jié)，只有讓學(xué)生全面認(rèn)識(shí)標(biāo)本采集與處理的全過(guò)程及影響因素，才能確保檢驗(yàn)結(jié)論的準(zhǔn)確性、有效性。

1.1標(biāo)本的采集

例如中段尿的采集，應(yīng)告知學(xué)生尿道內(nèi)是人體無(wú)菌的腔道，尿道外則是有菌的部位。所以采集中段尿時(shí)必須對(duì)外陰進(jìn)行徹底消毒，排出前一段尿液，以便沖洗外尿道或外陰，留取中段尿于無(wú)菌杯中送檢。

如痰標(biāo)本的采集，應(yīng)囑病人于清晨嗽洗口腔，咳出深部的痰液于無(wú)菌杯中送檢，如是支原體和衣原體的檢測(cè)，則應(yīng)留取女性宮頸拭子或男性尿道拭子，因?yàn)橹г�體和衣原體都只寄生在宮頸或者尿道的柱狀上皮細(xì)胞內(nèi)。

1.2標(biāo)本的處理

學(xué)生應(yīng)知道，標(biāo)本的`及時(shí)處理接種對(duì)微生物的成活率至關(guān)重要，例如淋病奈瑟氏菌，需要保溫，保濕送檢，提倡床邊接種，培養(yǎng)基應(yīng)先預(yù)溫，接種后放36℃溫箱、5%co2環(huán)境，保濕培養(yǎng)。又如痰標(biāo)本應(yīng)接種在血平板，巧克力平板，沙基，嗜血流感巧克力平板上，血平板和巧克力平板主要觀察病人痰標(biāo)本里的基礎(chǔ)菌群的生長(zhǎng)狀態(tài)。

沙基主要觀察是否有念珠菌生長(zhǎng)，嗜血流感巧克力平板主要是觀察是否有嗜血流感桿菌屬的生長(zhǎng)，此平板在配制時(shí)加入了針對(duì)性抗菌藥物，能夠抑制革蘭氏陰性桿菌和革蘭氏陽(yáng)性球菌的生長(zhǎng)，只適合于嗜血桿菌屬的生長(zhǎng)。學(xué)生應(yīng)學(xué)會(huì)每一份標(biāo)本，接種到相應(yīng)有用、有目的、有選擇的培養(yǎng)基中。

2、注重特征、綜合分析

細(xì)菌的鑒定是運(yùn)用所學(xué)知識(shí)，綜合性判斷的過(guò)程。它需要根據(jù)病人基本信息，標(biāo)本來(lái)源、診斷、平板上形態(tài)特征，生長(zhǎng)情況，氧化酶、觸酶陰陽(yáng)性狀、革蘭氏染色鏡下形態(tài)，生化反應(yīng)，藥敏結(jié)果等進(jìn)行綜合性判斷，最終得出鑒定結(jié)果。

我們?cè)趲Ы踢^(guò)程中應(yīng)根據(jù)以上信息，逐項(xiàng)分析，深入淺出，理論聯(lián)系實(shí)際，把學(xué)生在課堂中所學(xué)知識(shí)調(diào)動(dòng)出來(lái)，溫故知新，對(duì)病人標(biāo)本的狀況加以充分闡述，循序漸進(jìn)，循循誘導(dǎo)。加深學(xué)生在視覺(jué)、聽(tīng)覺(jué)、嗅覺(jué)的印象。例如革蘭氏陰性桿菌和革蘭氏陽(yáng)性球菌在血平板，巧克力平板是有區(qū)別的。

革蘭氏陰性桿菌在平板上菌落直徑較大，約3-5mm，突起、圓形，濕潤(rùn)、有光澤感，我把它比作面包。革蘭氏陽(yáng)性球菌，在平板以上菌落直徑較小，約2-3mm，較前者小、圓形、濕潤(rùn)。有光澤感，但不如前者，貼平板生長(zhǎng)，我把它比作餅。一包一餅就簡(jiǎn)單易記地把革蘭氏陰性桿菌和革蘭氏陽(yáng)性球菌區(qū)分開(kāi)來(lái)。

使細(xì)菌菌落生活化，形象化，易于記憶。如銅綠假單胞在平板上菌落邊緣不整齊，有綠色素，菌落邊緣向外延長(zhǎng)，培養(yǎng)時(shí)間越長(zhǎng)菌落越大，有特殊的芳香氣味。學(xué)生通過(guò)芳香氣味等以上特征，進(jìn)一步識(shí)認(rèn)了銅綠假單胞菌。在常見(jiàn)的病人標(biāo)本中，所檢出的細(xì)菌菌落都具固有的特征和性狀，就像人與人之間通過(guò)性格，特征就能區(qū)分開(kāi)來(lái)。

我們也應(yīng)該把各種細(xì)菌在平板上的菌落特征加以描述，學(xué)生就較易接受學(xué)懂。

3、培養(yǎng)學(xué)生自學(xué)能力和動(dòng)手能力。

專科和本科的學(xué)生在微生物室的實(shí)習(xí)時(shí)間大約有八至九周。在第一周，會(huì)安排學(xué)習(xí)培養(yǎng)基的制備，在此期間學(xué)習(xí)微生物室常用培養(yǎng)基的制備，如巧克力平板、SS平板、麥康凱平板、藥敏平板、營(yíng)養(yǎng)瓊脂平板、淋基平板、肉湯管、雙糖管、TCBS平板、4號(hào)瓊脂平板等的制備過(guò)程。

帶教老師將邊帶邊放手讓學(xué)生自己做一些基本的操作，如消毒平板、配制培養(yǎng)基，天平稱量，復(fù)溶瓊脂加血，倒平板等基本功的操作。第二周學(xué)習(xí)梅毒初篩，確證試驗(yàn)和血清學(xué)的一些試驗(yàn)，也將學(xué)習(xí)衣原體、支原體的檢測(cè)方法。第三到九周將學(xué)習(xí)細(xì)菌的鑒定。

用一至兩周時(shí)間學(xué)習(xí)各類標(biāo)本的接種，平板的選擇，平板分區(qū)劃線，熟練掌握接種的流程。第五周開(kāi)始學(xué)習(xí)各類細(xì)菌的生化鑒定和藥敏試驗(yàn)。帶教老師應(yīng)結(jié)合平板上菌落形態(tài)。鏡下革蘭氏染色結(jié)果，各類平板上生長(zhǎng)情況，病人的基本資料，診斷，本標(biāo)來(lái)源等基本信息分析評(píng)述給學(xué)生聽(tīng)，逐步推論出細(xì)菌的大致方向，正確引導(dǎo)學(xué)生的思路。

學(xué)生在每天應(yīng)對(duì)比較常見(jiàn)而且較有意義的細(xì)菌進(jìn)行鑒定，做生化反應(yīng)及藥敏試驗(yàn)，通過(guò)四周自己動(dòng)手操作，能對(duì)臨床上常見(jiàn)的細(xì)菌有一定的認(rèn)識(shí)，能把菌鑒定到種。通過(guò)實(shí)踐提高學(xué)生的動(dòng)手能力，熟練掌握細(xì)菌室的基本操作技能。深化理論知識(shí)，使到理論與實(shí)踐融會(huì)貫通。提倡學(xué)生多提問(wèn)，有疑問(wèn)老師及時(shí)解答與學(xué)生的學(xué)習(xí)相動(dòng)。